■ Maamaa me te tere: Ka taea te tiki i te katoa o te RNA i roto i te 60 meneti.
■ Te whakaputanga nui: Ka taea e ia te whakatutuki i nga whakaritenga o te tangohanga a-ringa tae atu ki te tangohanga puranga i runga i nga tini waahanga nui-whakaputa.
■ Haumaru me te kore-paitini: Kaore he reagent penei i te phenol / chloroform e hiahiatia.
Momo: Nga momo peara autika momo tangohanga.
Tauira: Tissue, cells and toto.
Whāinga: Tapeke RNA
Rahinga tiimata: 5-20 mg, kaua e neke ake i te 1 × 107, 0,1-1,5 ml
Te wa mahi: 60 min
Nga tono ki raro: RT-PCR / RT-qPCR, hanga whare pukapuka NGS, etc.
Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)
Ko te RNA katoa i tangohia mai i te ate kiore 20 mg me te TIANGEN Tissue Tissue / Cell / Blood Total RNA Kit me nga hua e tika ana mai i etahi atu kaiwhakarato. 5 μl o 200 μl eluate i utaina ki te 1% agarose gel electrophoresis, 6 V / cm. Whakamutunga: Ko te tangohanga tangohanga, te ma me te pumau o te TIANGEN Tissue Tissue / Cell / Blood Tapeke RNA Kit he pai ake i etahi atu o nga kaiwhakarato. |
|
Ko te RNA Tapeke i tangohia mai i te 20 mg o te kiore tote me te TIANGEN Tissue Tissue / Cell / Blood Tapeke RNA Kit i TIANGEN TGuide S32 ko Thermo Kingfisher Flex96 ranei. 5 μl o 200 μl eluate i utaina ki te 1% agarose gel electrophoresis, 6 V / cm. Tohu: TIANGEN D15000 DNA Tohu. Whakapuakanga: Ko te Hononga Motuhake / Waea / Toto Tapeke RNA Katoa he hua tangohanga pai me te ma i roto i nga momo tangohanga aunoa. |
Ko te A-1 Cell lysis homogenization ranei kaore i rawaka
---- Whakaitihia te whakamahinga tauira, whakapiki i te maha o te miihini lysis, whakanui i te homogenization me te waa lysis.
A-2 Tauira tauira he nui rawa
---- Whakaitihia te nui o te tauira e whakamahia ana hei whakanui ranei i te rahinga o te miihini lysis.
A-1 He kore e ranea te lysis pūtau, te homogenization ranei
---- Whakaitihia te whakamahinga tauira, whakapiki i te maha o te miihini lysis, whakanui i te homogenization me te waa lysis.
A-2 Tauira tauira he nui rawa
---- Tena koa tirohia te kaha tukatuka kaha
A-3 RNA kaore i te whakahekehia katoatia mai i te pou
---- I muri i te taapiri i te wai RNase-Koreutu, waiho mo etahi meneti i mua i te hautanga o te tinana.
A-4 Ethanol i roto i te mua
---- I muri i te horoinga, whakaahihia ano ka tangohia te miihini horoi ka taea.
Ko te A-5 ahurea reanga ahurei kaore i te tangohia katoa
---- I te wa e kohikohi ana i nga ruma, kia kaha ki te tango i te reo ahurea i te waa e taea ana.
A-6 Ko nga ruma e penapena ana ki te RNAstore kaore i te haukuhia
---- Ko te kiato RNAstore he nui ake i te toharite ahurea ahurea pūtau; no reira me whakaneke ake te kaha centrifugal. Ka whakaarohia kia haangotahuahia te 3000x g.
A-7 Ihirangi RNA Iti me te nui i roto i te tauira
---- Whakamahia he tauira pai hei whakatau mena na te tauira te hua-iti.
A-1 Ko nga rauemi ehara i te hou
---- Ko nga kakano hou me rongoa i te hauota waipiro tonu, ka hoatu ranei ki roto ki te urupare RNAstore kia pai ai te tango i te hua.
A-2 Tauira tauira he nui rawa
---- Whakaitihia te nui o te tauira.
A-3 RNase poken
---- Ahakoa ko te buffer kei roto i te kete kaore he RNase, he maama noa te whakapoke i te RNase i te wa o te tangohanga me te aata whakahaere.
A-4 Te parahanga electrophoresis
---- Whakakapihia te miihini hiko me te whakarite kia kore e poke te RNase i nga whakapau me te Utauta Whakahaa.
A-5 He nui te utaina mo te hiko
---- Whakaitihia te nui o nga tauira tauira, ko te utaina o ia puna kaore e neke ake i te 2 μg.
A-1 Tauira tauira he nui rawa
---- Whakaitihia te nui o te tauira.
A-2 Ko etahi tauira he nui te kiko o te DNA ka taea te rongoa ma DNase.
---- Whakamahia te RNase-Koreutu maimoatanga DNase ki te otinga RNA kua whiwhia, a ka taea te whakamahi tika i te RNA mo nga whakamatautau i muri mai i muri i te maimoatanga, ka taea ranei te purea e nga kete horoi a RNA.
Mo nga karaehehehe, ka tunua ki te 150 ° C mo te 4 h. Mo nga ipu kirihou, ka rumakina ki te 0.5 M NaOH mo te 10 meneti, katahi ka horoia ki te wai kore RNase ka whakapirihia kia whakakorea rawa te RNase. Ko nga urupare, nga rongoa ranei e whakamahia ana i te whakamatautau, ina koa ko te wai, me herekore ki te RNase. Whakamahia he wai kore RNase mo nga whakaritenga reagent katoa (taapirihia he wai ki te pounamu karaihe ma, taapirihia te DEPC ki te kukunga whakamutunga o 0.1% (V / V), ruru i te po me te autoclave).
Mai i tana whakaturanga, ko ta maatau wheketere kei te whakawhanake i nga hua o te ao tuatahi me te pupuri i te kaupapa
Tuhinga o mua. Kua pai te rongonui o a maatau hua i te umanga me te reanga pono i waenga i nga kaihoko hou me nga tawhito.