■ Whanui tono: Ka taea te whakamahi i te kete ki te tango gDNA mai i nga momo waahi toto kia tika.
■ Te kounga teitei: Ma te punaha miihini lysis motuhake, ko te DNA maamaa me te kaha nui, te maemaa me te honohono pai ka ea nga hiahia o te miihini maramara me te raupapa whakaputa-nui.
■ Tere me te kore-paitini: Ka whakamahia e te kete te hangarau panui membrane silica, a kaore e hiahiatia te phenol me te chloroform. Ko te mahinga tangohanga katoa ka taea te whakaoti i roto i te haora kotahi.
He pai mo nga momo tono auau, pēnei i te rāhuitanga whākōkī whākōkī, PCR, hanga wharepukapuka, Hoko tonga, maramara whakakaa me te raupapa whakaputa-nui, aha atu.
Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)
Ko te DNA genomic o nga tauira waahi toto tangata i tangohia ma te whakamahi i te TIANamp Blood Spots DNA Kit e ai ki te kawa paerewa. Tauira tīmatanga tauira: 3 nga waahanga o te 3 x 3 mm toto toto. Ko te 2 μl o te 50 μl eluents i whakamahia hei tauira PCR. Whakamahia te whakanui PCR o Actb (300 bp), PrP (750 bp) me DN1.0 (1 kb) i roto i te punaha urupare 20 μl PCR. 5 μl o nga hua PCR i utaina mo ia raina.
A-1 Te iti o te pūtau me te huaketo kei roto i te tauira tiimata - Whakarangarangahia te kohinga o nga puoro me nga wheori ranei.
A-2 Kaore i rawaka te raiti o nga tauira —Kahore ano kia konatunatua ki nga ipu pararau te tauira. E kiia ana kia nui rawa te whakaranu ma te puru-purongo mo nga wa 1-2. —Kore i te rawaka te mate o te rewharewha reoro na te ngoikoretanga o te ngohe o te proteinase K. —Kore i te rawaka te waikawa o te reenga, te ngoikore ranei o te pūmua na te iti o te waa kaukau mahana. E kii ana kia tapahia nga kiko kia iti, kia roa te waa kaukau ki te tango i nga toenga katoa o te lysate.
A-3 He iti rawa te aitanga DNA. —Kahore he etanol, he orau-iti-haurua, kaua ki te 100% te etanol i taapirihia i mua i te whakawhitinga o te lysate ki te pou miro.
A-4 He iti rawa te uara pH o te buffer elution. —Whakaritea te pH ki waenga i te 8.0-8.3.
Te waihotanga toenga i roto i nga kaumatua.
—E toe ana te toenga horoi PW i roto i nga tau tekau ma rua. Ka taea te tango i te etanol ma te whakaheke i te pou miro mo te 3-5 meneti, ka tuu ai ki te paemahana ruima 50 ℃ ranei mo te 1-2 meneti.
A-1 Ko te tauira ehara i te hou. —Tohia he tauira DNA pai hei whakahaere whakatau mena kua heke te DNA o te tauira.
A-2 Te maimoatanga tika i mua. —Na te kaha o te huri o te hauota waipiro, te whakahoki ano i te houku, te nui rawa ranei o te tauira.
Me rereke nga maakutu mo nga tauira rereke. Mo nga tauira whakato, kia kaha ki te huri i te hauota wai. Mo nga tauira kararehe, homogenate ka tino huri ranei ki te hauota wai. Mo nga tauira he pakitara pakitara he uaua ki te pakaru, penei i te huakita G + me te rewena, ka kiia kia whakamahia te lysozyme, te lyticase me nga tikanga miihini hei pakaru i nga pakitara o te ruma.
4992201/4992202 Ko te kete DNA Genomic tipu ka tango i te tikanga haangai-pou e hiahia ana ki te chloroform mo te tangohanga. He pai rawa atu mo nga momo tipu tipu, me te paura paura maroke. Ko te Hi-DNAsecure Plant Kit he hangai ano ki te pou, engari kaore he hiahia o te tangohanga phenol / chloroform, kia haumaru ai, kia kore e paitini. He pai mo nga tipu me te nui o te polysaccharides me te kiko o te polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System ka tango i te tikanga inu-wai. Kaore e hiahiatia ana te tangohanga Phenol / chloroform. He maamaa te mahinga horoi me te nohopuku kaore he rohe mo nga tauira tiimatanga tauira, kia taea ai e nga kaiwhakamahi te whakarereke i te rahinga kia rite ki nga whakaritenga whakamatautau. He nui te rahi o nga whatianga gDNA ka taea te whiwhi me te nui o te hua.
Ka taea te tango i te tangohanga DNA o te toto toto ma te whakamahi i nga tauhohenga i roto i enei kete e rua ma te huri noa i te kawa ki nga tohutohu motuhake mo te tangohanga o te toto o te toto. Ka taea te tuku i tetahi kape maeneene o te kawa tango toto DNA i te wa e tono ana koe.
Taihoa te tauira hou me te 1 ml PBS, te tote noa, te buffer TE ranei. Homogenehia katoahia te tauira e te homogenizer ka kohikohi i te pari ki te pito o te ngongo ma te haukahukahu. Whakakahoretia te supernatant, ka whakahouhia te pupuhi ki te 200 μl buffer GA. Ko te purenga o te DNA e whai ake nei ka taea te mahi kia rite ki nga tohutohu.
Mo te purea o te gDNA i roto i te plasma, te serum me nga tauira waipiro o te tinana, e taunakihia ana te TIANamp Micro DNA Kit. Mo te purenga o te gDNA huaketo mai i nga tauira serum / plasma, e taunakitia ana te TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Mo te purenga o te kitakita gDNA mai i te serum me te tauira plasma, e taunakitia ana te TIANamp Bacteria DNA Kit (me whakauru te lysozyme mo te kitakita pai). Mo nga tauira huware, ko te Hi-Swab DNA Kit me te TIANamp Bacteria DNA Kit e taunaki ana.
Kei te taunakihia te Kete Whakatupato DNAsecure ranei te Punanga Whakato DNAquick mo te tangohanga o te genome harore. Mo te tangohanga o te genome rewena, ka taunakitia te TIANamp Yeast DNA Kit (me whakarite te lyticase).
Mai i tana whakaturanga, ko ta maatau wheketere kei te whakawhanake i nga hua o te ao tuatahi me te pupuri i te kaupapa
Tuhinga o mua. Kua pai te rongonui o a maatau hua i te umanga me te reanga pono i waenga i nga kaihoko hou me nga tawhito.