■ He ngawari ki te whakamahi: Ka ngawari te whakahaere i te raupaparorohiko i roto i te 1 h. Ko te kaupapa whakariterite PCR / qPCR ka taea te whakarereke me te whakawhiti tere.
■ Whakapau hototahi: Ko te pito pipette whakawhiti me te punaha Beckman Biomek 3000.
■ Te tiaki maamaa: Ko te waahanga pipetting aunoa (APM) ka taea te whakakapi me te whakahoki ano mo te whakakore.
■ Te tika me te tino tika.
Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)
Whakaahua 1: Ko nga hua o te kohinga paerewa qPCR e whakaatu ana he pai te tukurua Ko nga tauira cDNA o te 7 μl NIH 3T3 waatea kua waimeha kia 4 nga wa me te 21 μl o te wai i te tauwehenga o te 1: 4. Roche LightCycler 480 wa-pono fluorescence nui PCR taputapu me SuperReal PreMix Plus (SYBR Green) i whakamahia mo te kitenga. |
|
Whakaatu 2: He teitei ake te whakarite ki te pipetting a-ringa (Mauī: A-ringa; Matau: TEasy Pipetting Aunoa) 4 tukurua o te whakarahinga GAPDH tangata (kopiko runga). Taapirihia kia 2 μl cDNA ki te 18 μl MasterMix kia hanga 20 μl punaha tauhohenga. I whakamahia a Roche LightCycler 480 i te wa-roa te haangai PCR me te SuperReal PreMix Plus (SYBR Green) mo te kitenga. |
Mai i tana whakaturanga, ko ta maatau wheketere kei te whakawhanake i nga hua o te ao tuatahi me te pupuri i te kaupapa
Tuhinga o mua. Kua pai te rongonui o a maatau hua i te umanga me te reanga pono i waenga i nga kaihoko hou me nga tawhito.