RNAprep Moni Tika

Mo te purea tae atu ki te 100 μg katoa o te RNA mai i nga kiko kararehe.

Ko te RNAprep Pure Tissue Kit e whakarato ana i te tikanga nohopuku, ngawari, whai hua hoki mo te purea o te RNA katoa mai i nga kopa kararehe ma te whakamahi i te pou miro whai hua me te punaha whakaranu ahurei. Kei roto i te kete nga pou miro RNase-Koreutu CR3 mo te pure i te RNA kounga tiketike ma te whakamahi i te hangarau silica-membrane. Ko te RNA katoa tino kounga ka taea te tiki mai i roto i te 40-50 meneti me te tino ma, kaore hoki he poteine me te paru genomic DNA.

Ngeru. No.	Rahinga Peke
4992236	50 preps

Tukuna imeera ki a maatau

Taipitopito Hua

Tauira Whakamatau

FAQ

Tohu Hua

Āhuahira

■ Ma te whakaraerae mo nga kopa kararehe e ngawari ai te mahinga.
■ Motuhake DNase Ka whakaitihia e ahau te paru genomic DNA.
■ Ko te maemaa-teitei ake me te RNA kua rite-ki te whakamahi he pai mo nga tono whakararo whakararo.
■ Kaore he tangohanga phenol / chloroform, kaore he LiCl me te etanol, kaare e hiahiatia he centrugation gradients CsCl, kia pai ai te pono o te mahi.

Nga tono

■ RT-PCR.
■ Poraka ki te Raki, Ira Ira.
■ PCR -Wa Rawa.
■ Tauhokohoko Tipi.
■ Tirohanga PolyA, whakamaoritanga in vitro, RNase whakamarumaru whakamarama me te taatai ngota ngota.

Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)

Tōmua: RNAprep Moni Rapu Momo / Momo Momo

Panuku: RNAprep Momo Peke FFPE

Rauemi: 20 mg embryo (13 ra), 15 mg tarai, 10 mg ate, 15 mg mokowhiti, 10 mg thymus, 20 mg pūkahukahu
Tikanga: Ko te RNA katoa mai i nga momo kiko o te kiore i purea ma te whakamahi i te RNAprep Moni Titi Tuturu.
Hua: Kua whakaatuhia i runga ake nei te pikitia hiko hiko gel-agarose. 2-4 μl o te 100 μl eluates i utaina mo ia raina.
M: TIANGEN DNA Tohu III;
Huarahi 1-2: Embryo (13 ra); Huarahi 3: Tākihi; Huarahi 4-6: ate; Huarahi 7: Karawhiu; Huarahi 8: Tou; Rarangi 9: Lung.
I whakahaerehia te electrophoresis i te 6 V / cm mo te 30 meneti mo te 1% agarose gel ..

Q: Te aukati i te Tīwae

Ko te A-1 Cell lysis homogenization ranei kaore i rawaka

---- Whakaitihia te whakamahinga tauira, whakapiki i te maha o te miihini lysis, whakanui i te homogenization me te waa lysis.

A-2 Tauira tauira he nui rawa

---- Whakaitihia te nui o te tauira e whakamahia ana hei whakanui ranei i te rahinga o te miihini lysis.

Q: Hua RNA Iti

A-1 He kore e ranea te lysis pūtau, te homogenization ranei

---- Whakaitihia te whakamahinga tauira, whakapiki i te maha o te miihini lysis, whakanui i te homogenization me te waa lysis.

A-2 Tauira tauira he nui rawa

---- Tena koa tirohia te kaha tukatuka kaha

A-3 RNA kaore i te whakahekehia katoatia mai i te pou

---- I muri i te taapiri i te wai RNase-Koreutu, waiho mo etahi meneti i mua i te hautanga o te tinana.

A-4 Ethanol i roto i te mua

---- I muri i te horoinga, whakaahihia ano ka tangohia te miihini horoi ka taea.

Ko te A-5 ahurea reanga ahurei kaore i te tangohia katoa

---- I te wa e kohikohi ana i nga ruma, kia kaha ki te tango i te reo ahurea i te waa e taea ana.

A-6 Ko nga ruma e penapena ana ki te RNAstore kaore i te haukuhia

---- Ko te kiato RNAstore he nui ake i te toharite ahurea ahurea pūtau; no reira me whakaneke ake te kaha centrifugal. Ka whakaarohia kia haangotahuahia te 3000x g.

A-7 Ihirangi RNA Iti me te nui i roto i te tauira

---- Whakamahia he tauira pai hei whakatau mena na te tauira te hua-iti.

Q: Te whakaheke i te RNA

A-1 Ko nga rauemi ehara i te hou

---- Ko nga kakano hou me rongoa i te hauota waipiro tonu, ka hoatu ranei ki roto ki te urupare RNAstore kia pai ai te tango i te hua.

A-2 Tauira tauira he nui rawa

---- Whakaitihia te nui o te tauira.

A-3 RNase poken

---- Ahakoa ko te buffer kei roto i te kete kaore he RNase, he maama noa te whakapoke i te RNase i te wa o te tangohanga me te aata whakahaere.

A-4 Te parahanga electrophoresis

---- Whakakapihia te miihini hiko me te whakarite kia kore e poke te RNase i nga whakapau me te Utauta Whakahaa.

A-5 He nui te utaina mo te hiko

---- Whakaitihia te nui o nga tauira tauira, ko te utaina o ia puna kaore e neke ake i te 2 μg.

Q: DNA poke

A-1 Tauira tauira he nui rawa

---- Whakaitihia te nui o te tauira.

A-2 Ko etahi tauira he nui te kiko o te DNA ka taea te rongoa ma DNase.

---- Whakamahia te RNase-Koreutu maimoatanga DNase ki te otinga RNA kua whiwhia, a ka taea te whakamahi tika i te RNA mo nga whakamatautau i muri mai i muri i te maimoatanga, ka taea ranei te purea e nga kete horoi a RNA.

Q: Me pehea te tango i te RNase mai i nga whakapau whakamatautau me nga miihini karaihe?

Mo nga karaehehehe, ka tunua ki te 150 ° C mo te 4 h. Mo nga ipu kirihou, ka rumakina ki te 0.5 M NaOH mo te 10 meneti, katahi ka horoia ki te wai kore RNase ka whakapirihia kia whakakorea rawa te RNase. Ko nga urupare, nga rongoa ranei e whakamahia ana i te whakamatautau, ina koa ko te wai, me herekore ki te RNase. Whakamahia he wai kore RNase mo nga whakaritenga reagent katoa (taapirihia he wai ki te pounamu karaihe ma, taapirihia te DEPC ki te kukunga whakamutunga o 0.1% (V / V), ruru i te po me te autoclave).

Tuhia to korero ki konei ka tuku mai ki a maatau