Peke RNAclean

Ko te A-1 Cell lysis homogenization ranei kaore i rawaka

---- Whakaitihia te whakamahinga tauira, whakapiki i te maha o te miihini lysis, whakanui i te homogenization me te waa lysis.

A-2 Tauira tauira he nui rawa

---- Whakaitihia te nui o te tauira e whakamahia ana hei whakanui ranei i te rahinga o te miihini lysis.

A-1 He kore e ranea te lysis pūtau, te homogenization ranei

---- Whakaitihia te whakamahinga tauira, whakapiki i te maha o te miihini lysis, whakanui i te homogenization me te waa lysis.

A-2 Tauira tauira he nui rawa

---- Tena koa tirohia te kaha tukatuka kaha

A-3 RNA kaore i te whakahekehia katoatia mai i te pou

---- I muri i te taapiri i te wai RNase-Koreutu, waiho mo etahi meneti i mua i te hautanga o te tinana.

A-4 Ethanol i roto i te mua

---- I muri i te horoinga, whakaahihia ano ka tangohia te miihini horoi ka taea.

Ko te A-5 ahurea reanga ahurei kaore i te tangohia katoa

---- I te wa e kohikohi ana i nga ruma, kia kaha ki te tango i te reo ahurea i te waa e taea ana.

A-6 Ko nga ruma e penapena ana ki te RNAstore kaore i te haukuhia

---- Ko te kiato RNAstore he nui ake i te toharite ahurea ahurea pūtau; no reira me whakaneke ake te kaha centrifugal. Ka whakaarohia kia haangotahuahia te 3000x g.

A-7 Ihirangi RNA Iti me te nui i roto i te tauira

---- Whakamahia he tauira pai hei whakatau mena na te tauira te hua-iti.

A-1 Ko nga rauemi ehara i te hou

---- Ko nga kakano hou me rongoa i te hauota waipiro tonu, ka hoatu ranei ki roto ki te urupare RNAstore kia pai ai te tango i te hua.

A-2 Tauira tauira he nui rawa

---- Whakaitihia te nui o te tauira.

A-3 RNase poken

---- Ahakoa ko te buffer kei roto i te kete kaore he RNase, he maama noa te whakapoke i te RNase i te wa o te tangohanga me te aata whakahaere.

A-4 Te parahanga electrophoresis

---- Whakakapihia te miihini hiko me te whakarite kia kore e poke te RNase i nga whakapau me te Utauta Whakahaa.

A-5 He nui te utaina mo te hiko

---- Whakaitihia te nui o nga tauira tauira, ko te utaina o ia puna kaore e neke ake i te 2 μg.

A-1 Tauira tauira he nui rawa

---- Whakaitihia te nui o te tauira.

A-2 Ko etahi tauira he nui te kiko o te DNA ka taea te rongoa ma DNase.

---- Whakamahia te RNase-Koreutu maimoatanga DNase ki te otinga RNA kua whiwhia, a ka taea te whakamahi tika i te RNA mo nga whakamatautau i muri mai i muri i te maimoatanga, ka taea ranei te purea e nga kete horoi a RNA.

Mo nga karaehehehe, ka tunua ki te 150 ° C mo te 4 h. Mo nga ipu kirihou, ka rumakina ki te 0.5 M NaOH mo te 10 meneti, katahi ka horoia ki te wai kore RNase ka whakapirihia kia whakakorea rawa te RNase. Ko nga urupare, nga rongoa ranei e whakamahia ana i te whakamatautau, ina koa ko te wai, me herekore ki te RNase. Whakamahia he wai kore RNase mo nga whakaritenga reagent katoa (taapirihia he wai ki te pounamu karaihe ma, taapirihia te DEPC ki te kukunga whakamutunga o 0.1% (V / V), ruru i te po me te autoclave).