■ Tauira ngawari ngawari tiimata: 2-400 μg tino maamaa DNA ka taea te tango mai i te 0.1-20 ml o nga momo toto.
■ Haumaru me te pono: Kaore he poke o nga whakarewa koiora penei i te phenol / chloroform.
He pai mo nga momo tono auau, penei i te aukati i te horonga, PCR, hanga wharepukapuka, Hauauru ki te Tonga (maramara whakakao o te raupapa whakapiki-nui), aha atu.
Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)
Te purenga o te genomic DNA mai i te 300 μl, 5 ml me te 10 ml te toto anticoagulation tangata me te EDTA ma te whakamahi i te RelaxGene Blood DNA System. 3 μl o te 200 μl, 500 μl me te 1 ml eluates i utaina mo ia raina. M: TIANGEN Tohu D15000. Nga hua whakamatautau: Ko te 0.1-20 ml o te toto ka taea te tango e te RelaxGene Blood DNA System me te pai o te raina. |
|
Ko te whakataurite i te DNA genomic i tangohia mai i te 300 μl anticoagulation tangata me te EDTA e whakamahi ana i te RelaxGene Blood DNA System me nga hua rite mai i etahi atu kaiwhakarato. M: TIANGEN Tohu D15000. 3 μl o 200 μl eluates i utaina mo ia raina. Nga hua whakamatautau: Whakatauritea ki etahi atu kaiwhakarato, Ka taea e te RelaxGene Blood DNA System te whiwhi hua teitei ake, te ma me te honohono o te toto gDNA. |
|
I tangohia nga Genomic DNA mai i nga tauira toto ma te whakamahi i te RelaxGene Blood DNA System. Tauira: 300 μl te toto anticoagulation tangata me te EDTA, EDTA / NaF, heparin me te sodium citrate; koti buffy mai i te toto 2 ml; 10 μl toto heihei me te 200 μl toto kiore. 3 μl o 200 μl eluates i utaina mo ia raina. M: TIANGEN Tohu D15000. Nga Hua Whakamatau: Ka taea te whakamahi i te Punaha DNA Roto Whaiwha mo te horoi i te DNA kounga teitei o nga anticoagulants tangata me nga maimoatanga rereke me te toto mai i nga momo momo. |
|
Othertahi atu Raupapara Raupaparorohiko |
A-1 Te iti o te pūtau me te huaketo kei roto i te tauira tiimata - Whakarangarangahia te kohinga o nga puoro me nga wheori ranei.
A-2 Kaore i rawaka te raiti o nga tauira —Kahore ano kia konatunatua ki nga ipu pararau te tauira. E kiia ana kia nui rawa te whakaranu ma te puru-purongo mo nga wa 1-2. —Kore i te rawaka te mate o te rewharewha reoro na te ngoikoretanga o te ngohe o te proteinase K. —Kore i te rawaka te waikawa o te reenga, te ngoikore ranei o te pūmua na te iti o te waa kaukau mahana. E kii ana kia tapahia nga kiko kia iti, kia roa te waa kaukau ki te tango i nga toenga katoa o te lysate.
A-3 He iti rawa te aitanga DNA. —Kahore he etanol, he orau-iti-haurua, kaua ki te 100% te etanol i taapirihia i mua i te whakawhitinga o te lysate ki te pou miro.
A-4 He iti rawa te uara pH o te buffer elution. —Whakaritea te pH ki waenga i te 8.0-8.3.
Te waihotanga toenga i roto i nga kaumatua.
—E toe ana te toenga horoi PW i roto i nga tau tekau ma rua. Ka taea te tango i te etanol ma te whakaheke i te pou miro mo te 3-5 meneti, ka tuu ai ki te paemahana ruima 50 ℃ ranei mo te 1-2 meneti.
A-1 Ko te tauira ehara i te hou. —Tohia he tauira DNA pai hei whakahaere whakatau mena kua heke te DNA o te tauira.
A-2 Te maimoatanga tika i mua. —Na te kaha o te huri o te hauota waipiro, te whakahoki ano i te houku, te nui rawa ranei o te tauira.
Me rereke nga maakutu mo nga tauira rereke. Mo nga tauira whakato, kia kaha ki te huri i te hauota wai. Mo nga tauira kararehe, homogenate ka tino huri ranei ki te hauota wai. Mo nga tauira he pakitara pakitara he uaua ki te pakaru, penei i te huakita G + me te rewena, ka kiia kia whakamahia te lysozyme, te lyticase me nga tikanga miihini hei pakaru i nga pakitara o te ruma.
4992201/4992202 Ko te kete DNA Genomic tipu ka tango i te tikanga haangai-pou e hiahia ana ki te chloroform mo te tangohanga. He pai rawa atu mo nga momo tipu tipu, me te paura paura maroke. Ko te Hi-DNAsecure Plant Kit he hangai ano ki te pou, engari kaore he hiahia o te tangohanga phenol / chloroform, kia haumaru ai, kia kore e paitini. He pai mo nga tipu me te nui o te polysaccharides me te kiko o te polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System ka tango i te tikanga inu-wai. Kaore e hiahiatia ana te tangohanga Phenol / chloroform. He maamaa te mahinga horoi me te nohopuku kaore he rohe mo nga tauira tiimatanga tauira, kia taea ai e nga kaiwhakamahi te whakarereke i te rahinga kia rite ki nga whakaritenga whakamatautau. He nui te rahi o nga whatianga gDNA ka taea te whiwhi me te nui o te hua.
Ka taea te tango i te tangohanga DNA o te toto toto ma te whakamahi i nga tauhohenga i roto i enei kete e rua ma te huri noa i te kawa ki nga tohutohu motuhake mo te tangohanga o te toto o te toto. Ka taea te tuku i tetahi kape maeneene o te kawa tango toto DNA i te wa e tono ana koe.
Taihoa te tauira hou me te 1 ml PBS, te tote noa, te buffer TE ranei. Homogenehia katoahia te tauira e te homogenizer ka kohikohi i te pari ki te pito o te ngongo ma te haukahukahu. Whakakahoretia te supernatant, ka whakahouhia te pupuhi ki te 200 μl buffer GA. Ko te purenga o te DNA e whai ake nei ka taea te mahi kia rite ki nga tohutohu.
Mo te purea o te gDNA i roto i te plasma, te serum me nga tauira waipiro o te tinana, e taunakihia ana te TIANamp Micro DNA Kit. Mo te purenga o te gDNA huaketo mai i nga tauira serum / plasma, e taunakitia ana te TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Mo te purenga o te kitakita gDNA mai i te serum me te tauira plasma, e taunakitia ana te TIANamp Bacteria DNA Kit (me whakauru te lysozyme mo te kitakita pai). Mo nga tauira huware, ko te Hi-Swab DNA Kit me te TIANamp Bacteria DNA Kit e taunaki ana.
Kei te taunakihia te Kete Whakatupato DNAsecure ranei te Punanga Whakato DNAquick mo te tangohanga o te genome harore. Mo te tangohanga o te genome rewena, ka taunakitia te TIANamp Yeast DNA Kit (me whakarite te lyticase).
Mai i tana whakaturanga, ko ta maatau wheketere kei te whakawhanake i nga hua o te ao tuatahi me te pupuri i te kaupapa
Tuhinga o mua. Kua pai te rongonui o a maatau hua i te umanga me te reanga pono i waenga i nga kaihoko hou me nga tawhito.