■ Te taumira teitei: Whakamahia nga waikano kiki EvaGreen, he nui te taumira rewa o te kokiri rewa i te ahua kapi ka taea te wehewehe i te rereketanga o te turanga kotahi.
■ Mea tino nui: Whakamahia te antibody whakarereke wera polymerase DNA ki te whakaiti i te whakanui-kore motuhake me te whakapai ake i te kiko.
■ Te pumau nui: Ko te punaha Whakamaairangi maakete ka whakanui i te pumau o te nekehanga rewa me te whakapai ake i te pono o nga hua.
■ Whakatika ROX: Ko te tae ROX he mea takai motuhake, he ngawari ake te whakamahi me te whai hua ake o nga kitenga.
Patohia: Antibody whakarereke Taq DNA polymerase, EvaGreen.
Nga tono: Pato SNP e mohiotia ana; Te tirotiro SNP e kore e mohiotia; Te matawai i nga ira mutant e mohiotia ana; Tauhokohoko PCR methylation.
Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)
I tangohia te Genomic DNA mai i te 100 μl o te tauira toto tangata ma te whakamahi i te TIANamp Blood DNA Kit. 50 ng DNA i utaina mo te kitenga tuuturu PCR. E ai ki te whare pukapuka a NCBI SNP, ko te SNP e mohiotia ana mo te ira FEN1 (RS 174538) kua tohua ka kitea ma te whakamahi i a Roche LightCycle480. Ko nga hua e whai ake nei:
Ko nga kitenga e whakaatu ana ko te Kete Tauhokohoko HRM he tikanga wetewete kanga SNP pai me te kaha whakahoki o te piunga rewa o taua momo tauira, he whakatau maamaa mo nga momo genotypes me te kore he pohehe.
Nga korero SNP: …… CGGAAGAACACGTCG [A / G] CAGGAGCAGGCGCCT …… (Auautanga Tere: A = 0.314, G = 0.686)
Tuatahi: Mo te kongakonga 108 bp (FEN1_F: CCTCAACGCTCTCACCATTTTG; FEN1_R: GGCACTTCCTTTTCCGGTTGTG)
Mai i tana whakaturanga, ko ta maatau wheketere kei te whakawhanake i nga hua o te ao tuatahi me te pupuri i te kaupapa
Tuhinga o mua. Kua pai te rongonui o a maatau hua i te umanga me te reanga pono i waenga i nga kaihoko hou me nga tawhito.