2 × Taq PCR KaiwhakaakoMix Ⅱ

PRMI PCR tere me te tino whaihua me te aukati i te ahotea nui.

Ko te 2 × Taq PCR MasterMix Ⅱ he mea hou kua oti te whakapai ake me te whakahou ake i te miihini 2 × PCR me nga waahanga nui katoa o te urupare PCR engari ko te tauira DNA me nga timatanga.

Ngeru. No.	Rahinga Peke
4993001	1ml
4993002	5x1ml
4992912	20x5x1 ml
4992913	5 × 1ml
4992920	20 × 5 × 1ml
4992921	20 × 5 × 1ml

Tukuna imeera ki a maatau

Taipitopito Hua

Tauira Whakamatau

FAQ

Tohu Hua

Āhuahira

■ Te kaha o te whakarei ake: Ko nga waahanga DNA o nga rahi rereke (iti iho i te 5 kb) me nga punawai ka kaha te whakakaha.
■ Te mohio nui: Ko te iti iho i te 10 pg o nga waahanga whainga ka taea te whakakaha mai i nga tauira genomic.
■ Te awangawanga nui: Mo nga tauira me nga mea poke tino penei i te tauira / tikanga aa-kitakita-ka tangohia, ka ngawari te whakanui i te waahanga. Ko te ngohe polymerase kaore e pangia e te paari totoro me te rewa.
■ He ngawari ki nga tono: I ngawari te tere o te whakarite i te punaha tauhohenga. Ko te waahanga kua whakarahihia kei roto ko te 3 'mutunga dA-overhang, he pai ki te TA taarua.

Whakatakotoranga

Momo: Taq DNA polymerase
Tauira: Ma te tauira / ahurea huakita / maamaa tangohia
Tauira: > 10 pg
Rahinga whatianga: <5 kb
Nga tono: Ko te whakarahinga o te PCR o nga waahanga DNA, te tapanga DNA, te toronga tuatahi, te whakatau raupapa, te kitenga ira-nui, nga whakamatautau PCR haurua-maha, te kitenga DNA whaiwhai, etc.

Ka taea te whakarite i nga hua katoa mo te ODM / OEM. Mo nga taipitopito,pāwhiritia koa Ratonga Whakaritea (ODM / OEM)

Tōmua: 2 × GC-whakaranu PCR Mix

Panuku: Pūnaha PCR Maama Maama (me te waikano)

Whakaahua 1. Ko nga tauira mai i nga rereketanga rereke i whakapakarihia e TIANGEN Taq MasterMix II me te Taq Mix noa mai i te Kaiwhakarato TR, kia kitea ai te awangawanga o nga kaiwhakawai. Ko nga hua e whakaatu ana ka taea e nga hua TIANGEN te whakanui ake i nga waahanga i ahu mai i nga tauira genomic kino me te ahurea kitakita, he pai ake te awangawanga o te ahotea i to te Kaiwhakarato TR. A: Tauira genomic kino i tangohia e TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit. Prp / DN: Tango kino me te rapu tauira toto tangata. Raihi: Tango kino me te rapu tauira raihi. B: Koroni PCR. Ko te kongakonga PCR ko te 700 bp.
M: TIANGEN Tohu III

He pai mo te ao mo nga tauira mai i nga punaa rereke me nga roanga rereke
Whakaatu 2. Nga waahanga o nga momo puna me nga roa i whakarahihia ma te whakamahi i te TIANGEN Taq MasterMix II (A) me te noa Taq Whakaranu o te Kaiwhakarato TK (B), Kaiwhakarato TR (C), Kaiwhakarato V (D) me te Kaiwhakarato G (E). Ko nga kitenga e whakaatu ana ko te mahinga whanui o nga hua TIANGEN te mea pai rawa atu mo te whakanui i te kaha, te motuhake me te ao katoa.M: TIANGEN Tohu III1: Tauira DNA genomic Soybean (120 bp);

2-3: Tauira DNA genomic raihi (694 bp, 2258 bp);

4: Cotton genomic DNA tauira (200 bp);

5: Escherichia coli tauira DNA genomic (2298 bp);

6-7: Tauira DNA genome kiore (1 kb, 2 kb);

8-10: Tauira DNA genomic kiore (1 kb, 2 kb, 2080 bp);

11-18: Tauira DNA ira tangata (300 bp, 448 bp (GC%: 74.8%), 1100 bp, 750 bp,

1000 bp, 1090 bp (GC%: 70.4%), 2 kb, 4 kb)

Te aro nui
Whakaatu 3. He rereke nga kukume o te kiore me nga waahanga DNA tangata i whakarahihia ma te whakamahi i te TIANGEN Taq MasterMix II (A), noa Taq Whakaranu o te Kaiwhakarato V (B) me te Kaiwhakarato TK (C), hei tohu i te maaramatanga whakarahu. I whakaatuhia nga hua ka taea e te hua TIANGEN te whakanui i te waahanga i whakaritea mai i te tauira genome iti iho i te 0.01 ng, a ko tana mohio he pai ake i nga hua o te Kaihoko V me TK.M: TIANGEN Tohu III, N: NTCT Tauira whakauru 1-8 : 200 ng, 100 ng, 50 ng, 20 ng, 10 ng, 1 ng, 0.1 ng, 0.01 ng.

Q: Kaore he roopu whakarei

Tauira A-1

■ Kei roto i te tauira he parenga pararau he Taq aukati ranei, me era atu.

■ Kaore i oti te taatai o te tauira --— Ka tika te whakanui ake i te paemahana taangata me te whakaroa i te waa whakaheke.

■ Te whakaheke i te Tauira ——Whakaarahia te tauira.

A-2 Tuatahi

■ Te ngoikore o te kounga o nga tiimatanga ——Te whakahou i te tuatahi.

■ Te whakahekenga Tuatahi ——Whakaitihia te timatanga kukume teitei ki te rahinga iti hei whakaora. Aukati i te maha o te hukapapa me te rewa o te wa-roa kia 4 ° C ranei kia whakawhiwhia.

■ Te hoahoa tika o nga tiimatanga (hei tauira, kaore e rawaka te roa o te tiima, he iti ake te ahua i waenga i nga tiimatanga, me etahi atu.)

A-3 Mg²⁺kukū

■ Mg²⁺ he iti rawa te kukume ——Tika whakarahi i te Mg²⁺kukū: Arotautia te Mg²⁺ kukume na te raupapa urupare mai i te 1 mM ki te 3 mM me te waahi 0.5 mM ki te whakatau i te Mg tino pai²⁺ kukū mō ia tauira me te tuatahi.

A-4 Te taumaha o te pāmahana

■ Ko te nui o te mahana whakakapinga e pa ana ki te here o te tuatahi me te tauira. ——Whakaitihia te paemahana whakakotahitanga ka arotahi ki te ahua kia 2 ° C.

A-5 Taima toronga

■ Te wa poto toronga —— Whakanuia te waa whakaroanga.

Q: He pai he

Phenomena: Ko nga tauira kino e whakaatu ana i nga raina raupapa whaainga.

A-1 Whakakorenga o te PCR

■ Whakapoke i te raupapa whaainga, ki nga hua whakarahinga ranei—— Kia tupato kaua e pipitihia te tauira kei roto te raupapa whaainga i te tauira kino ka rukuhia atu ki waho o te ngongo centrifuge. Ko nga reagents me nga taputapu ranei kia autoclaved ki te whakakore i nga waikawa karihi o mua, a ko te noho o te paru me whakatau i roto i nga whakamatautau kino kino.

■ Whakakorenga reagent ——Whakaahuahia nga reagents ka penapena i te paemahana iti.

A-2 Pirimiar

■ Mg²⁺ he iti rawa te kukume ——Tika whakarahi i te Mg²⁺ kukū: Arotautia te Mg²⁺ kukume na te raupapa urupare mai i te 1 mM ki te 3 mM me te waahi 0.5 mM ki te whakatau i te Mg tino pai²⁺ kukū mō ia tauira me te tuatahi.

■ He huatahi te hoahoa tuatahi, ana ko te raupapa whaainga he homology me te raupapa kore-whaainga. ——Timua-hoahoa hou.

Q: Whakanui-kore motuhake

Phenomena: Ko nga roopu whakarei i te PCR kaore e rite ki te rahi e hiahiatia ana, he rahi, he iti ranei, i etahi wa ka puta etahi taura whakarahi motuhake me nga roopu whakanui-kore.

A-1 Paraimere

■ He koretake te whakatikatika

——Timua-hoahoa tuatahi.

■ He tiketike rawa te kukume tuatahi --—Taapiki whakaniko i te paemahana whakaheke me te whakaroa i te waa whakaheke.

A-2 Mg²⁺ kukū

■ Te Mg²⁺ he tiketike rawa te kukume ——Titohia te whakaiti i te kukume Mg2 +: Arotautia te Mg²⁺ kukume na te raupapa urupare mai i te 1 mM ki te 3 mM me te waahi 0.5 mM ki te whakatau i te Mg tino pai²⁺ kukū mō ia tauira me te tuatahi.

A-3 Tino polymerase

■ Te nui o te hauhautanga whaainga —— Te whakaiti i te nui o te whiu i te waatea o te 0.5 U.

A-4 Te taumaha o te pāmahana

■ He iti rawa te pāmahana whakauru ——Te tika ana whakapiki i te pāmahana annealing, whakamahia ranei te tikanga taatai e rua nga waahanga

Nga huringa A-5 PCR

■ He maha rawa nga huringa PCR ——Whakaitehia te maha o nga huringa PCR.

Q: Nga roopu papaki peera ranei

A-1 Paraimere——Pituhikohikohikohikohikohikohikore ana— mahia ranei ko PCR ohanga.

A-2 Tauira DNA

—— Kaore i te ma te tauira ——Whakaarahia te tauira tango i te DNA me nga kete purea ranei.

A-3 Mg²⁺ kukū

——Mg²⁺ he tiketike rawa te kukume ——Titohia me whakaiti te Mg²⁺ kukū: Arotautia te Mg²⁺ kukume na te raupapa urupare mai i te 1 mM ki te 3 mM me te waahi 0.5 mM ki te whakatau i te Mg tino pai²⁺ kukū mō ia tauira me te tuatahi.

A-4 dNTP

——Te teitei rawa te kukume o dNTPs——Titihia te kukutanga o dNTP tika

A-5 Te taumaha o te pāmahana

——Te iti rawa te mahana o te whakamomona ——Te tika ana ka whakapiki i te mahana whakamanamana

Huringa A-6

——Te maha rawa o nga huringa ——Ataa te tau huringa

Q: E hia nga tauira DNA me taapiri ki te punaha urupare 50 μl PCR?

Q: Me pehea te whakanui i nga waahanga roa?

Ko te mahi tuatahi ko te kowhiri i te polymerase e tika ana. Kaore e taea e te polymerase Taq auau te whakatika na te korenga o te 3'-5 'mahi exonuclease, a na te kore taurite e tino whakaitihia te kaha o te whakaraatanga o nga kongakonga. Na reira, kaore e taea e te Taq polymerase noa te whakanui i nga waahanga whainga nui atu i te 5 kb. Ko te Taq polymerase me nga whakarereke motuhake, tetahi atu polymerase pono ranei, me tohu ki te whakapai ake i te kaha o te toronga, me te whakatutuki i nga hiahia o te waahanga kaha roa. Hei taapiri, ko te whakarahi i nga waahanga roa ka hiahia ano kia whakatikatika i te hoahoa tuatahi, te waa whakahekenga, te waa toronga, te buffer pH, me etahi atu. Hei aukati i te kino o te tauira, me whakaiti te waa whakaheke i te 94 ° C ki te 30 hekere iti iho ranei mo ia huringa, me te wa e piki ai te mahana ki te 94 ° C i mua i te whakarahinga kia iti iho i te 1 meneti. Ano hoki, ko te tautuhi i te mahana whakawhaanui mo te 68 ° C me te hoahoa i te waa whakaroanga kia rite ki te tere o te 1 kb / min ka taea te whakarite kia kaha te whakanui i nga waahanga roa.

Q: Me pehea te whakapai ake i te pono o te PCR?

Ka taea te whakaheke i te reanga hapa o te whakanui PCR ma te whakamahi i nga momo polymerases DNA me te pono pono. I roto i nga Taq DNA polymerases katoa i kitea i tenei wa, ko te Pfu enzyme te reiti hapa iti me te pono pono (tirohia te teepu piri). I tua atu i te whiringa o te whākōkī, ka taea e ngā kairangahau te whakaheke i te reanga irakētanga PCR mā te whakarerekē i ngā tikanga tauhohenga, tae atu ki te whakarerekētanga o te whakahanumi, te kukū o te polymerase wera me te whakanui i te tau huringa PCR.

Tuhia to korero ki konei ka tuku mai ki a maatau